Increasing putative vector importance of Trichophoromyia phlebotomines (Diptera: Psychodidae)

Despite some phlebotomines being well recognised as vectors of leishmaniasis agents, vector importance of those belonging to the genus Trichophoromyia has not been extensively studied. The present study provides evidence regarding the putative vector role played by some species of Trichophoromyia on leishmanine enzootics, based on literature reports and findings obtained from field experiments conducted in the ecotopes of Pará State, Brazil. The species Th. ubiquitalis, Th. velascoi, Th. auraensis, Th. ininii and Th. brachipyga possess minimal criteria to be included in the list of suspected leishmanine vectors. However, knowledge on man-biting behavior, substantiation of vector competence and determination of epidemiological implications are limited for all of the above mentioned species. Published studies together with present data draw attention to prioritize these phlebotomine species in entomological surveillance programs and studies on experimental susceptibility to Leishmania spp. infection.

Ecology of phlebotomine sand flies in a Brazilian area with recent leishmaniasis transmission (Itaúna, in Minas Gerais state)

Abstract INTRODUCTION: Leishmaniasis constitutes a serious but neglected tropical disease. Recently, socio-environmental, biological and physical changes have altered the range of leishmaniasis, causing it to spread into urban areas. In Minas Gerais, the disease is endemic, exhibiting regional differences and reaching urban centers. The purpose of this study was to evaluate entomological aspects related to the ecoepidemiology of leishmaniasis in Itaúna. METHODS: Monthly catches with HP traps were carried out from June 2017 to May 2018, in three ecological areas (urban, rural, and forest). The adaptability of the species to anthropic environments was assessed using the synanthropy index (SI). RESULTS: We collected 1306 specimens of phlebotomine sand flies. Of the species of medical importance, Lutzomyia longipalpis, the vector of Leishmania infantum, represented 90.4% of the specimens identified at species level (n=1260). Nyssomyia whitmani, the vector of Leishmania braziliensis, represented 1.6% of the total. Lu. longipalpis displayed an SI of +95.8, a value that denotes a marked preference for human environments. For Ny. whitmani, the SI was -25, expressing the tendency of this species to occupy uninhabited areas. The population of the three most numerous species captured increased with rain, high temperatures, and high relative humidity. Although captured at low numbers, Ny. whitmani showed a different profile concerning the climate variables analyzed. CONCLUSIONS: Understanding the epidemiology of the disease may assist the health services in formulating effective control measures for improving community health and contributing to the establishment of a dynamic relationship and a global awareness of the health/disease process.

Molecular detection of Leishmania spp in Lutzomyia longipalpis in the city of Lavras, Minas Gerais, Brazil

Leishmaniasis is a neglected disease that affects a large part of the world population. Knowing the sand fly fauna of a region is of fundamental importance for guiding health surveillance actions related to the prevention and control of leishmaniasis. A total of 86 specimens of sand flies (60 females and 26 males) were collected. Using the classification proposed by Galati (2003), the following species were identified: Lutzomyia longipalpis (Lutz & Neiva, 1912), Migonemyia migonei (França, 1920), Evandromyia cortelezzi (Brethes, 1923), Ev. sallesi (Galvão & Coutinho, 1939), Nyssomyia whitmani (Atunes & Coutinho, 1939), Psathyromyia lutziana (Costa Lima, 1932), Ev. lenti (Mangabeira, 1938), Brumptomyia sp. (França and Parrot, 1921), and Pressatia sp. (Mangabeira, 1942). Using PCR with internal transcribed spacer target to identify infected sand flies, five Lu. longipalpis females were infected with Leishmania spp. Despite the small number of specimens collected, considerable species diversity was found in the study area.

Chicken eggs as a surveillance tool for malaria and leishmaniasis vector presence

Abstract INTRODUCTION: Malaria and leishmaniases are transmitted by vectors during blood-feeding. Vector-infected animals develop antibodies against the vector's saliva. This study evaluated IgY antibody detection in the chicken eggs exposed to bites from Migonemyia migonei, Lutzomyia longipalpis and Anopheles aquasalis. METHODS: We used ELISA to quantify the antibody levels in the sera and exposed chicken eggs. RESULTS: High IgY levels were observed following immunization; furthermore, higher reactivity was observed in the eggs and species-specific immune response was observed post final immunization. CONCLUSIONS: Chicken eggs can be used as sentinels to surveil vector saliva antibodies.

Epidemiología de las principales enfermedades transmitidas por vectores en Colombia, 1990-2016 / Transmission scenarios of major vector-borne diseases in Colombia, 1990-2016

Resumen Introducción. Las enfermedades transmitidas por vectores representan más de 17 % de todas las enfermedades infecciosas y causan anualmente un millón de defunciones a nivel mundial. En Colombia, la malaria, el dengue, la enfermedad de Chagas y las leishmaniasis son condiciones endemoepidémicas persistentes. Objetivo. Determinar el comportamiento epidemiológico de las enfermedades transmitidas por vectores en zonas urbanas y rurales de Colombia entre 1990 y 2016. Materiales y métodos. Se hizo un estudio descriptivo del comportamiento epidemiológico de las principales enfermedades transmitidas por vectores en zonas urbanas y rurales de Colombia entre 1990 y 2016, con la información proveniente de fuentes oficiales secundarias. Resultados. En el periodo estudiado se registraron 5'360.134 casos de enfermedades transmitidas por vectores, de los cuales 54,7 % fueron de malaria y 24,9 % de dengue. Estos casos concentraron el 80 % de la carga acumulada de casos de enfermedades transmitidas por vectores. Las medianas de las tasas de incidencia fueron 1.371 y 188 por 100.00 habitantes para malaria y dengue, respectivamente. Además, los casos de chikungunya fueron 774.831 desde su introducción en el 2014 y, los de Zika, 117.674 desde su aparición en 2015. En las zonas rurales predominaron las enfermedades parasitarias transmitidas por vectores como la malaria, las leishmaniasis y la enfermedad de Chagas. A nivel urbano, predominaron el dengue, el chikungunya y el Zika. Conclusiones. La transmisión en Colombia de estas enfermedades es persistente en las zonas urbanas y en las rurales, y de tipo endemoepidémico en los casos de malaria, dengue, leishmaniasis y enfermedad de Chagas. Dicha transmisión se ha dado de manera focalizada y con patrones variables de intensidad. Asimismo, se mantienen las condiciones que han favorecido la transmisión emergente de nuevas arbovirosis.

Abstract Introduction: Vector-borne diseases account for more than 17% of all infectious diseases and annually they cause one million deaths worldwide. In Colombia, malaria, dengue, Chagas disease, and leishmaniasis are persistent endemo-epidemic events. Objective: To determine the behavior and transmission scenarios of vector-borne diseases in Colombia between 1990 and 2016. Materials and methods: We conducted a descriptive study on the epidemiological behavior of the main vector-borne diseases in Colombia between 1990 and 2016 based on information from official secondary sources. Results: During the study period, there were 5,360,144 cases of vector-borne diseases, 54.7% of which were due to malaria and 24.9% to dengue, accounting for 80% of the cumulative disease burden of vector-borne disease cases. The median incidence rates were 1,371 and 188 per 100,000 inhabitants for malaria and dengue, respectively. In addition, emerging events such as Chikungunya registered 774,831 cases since its introduction in 2014, while 117,674 Zika fever cases were reported since its emergence in 2015. In rural settings, parasitic vector-borne diseases such as malaria, leishmaniasis and Chagas disease predominated, while in urban scenarios dengue, chikungunya and Zika were predominant. Conclusions: Persistent epidemic and endemic transmission of vector-borne diseases in urban and rural settings in Colombia was observed mainly in the case of malaria, dengue, leishmaniasis and Chagas disease. Such transmission was focused and had variable intensity patterns. On the other hand, the conditions that have favored the emergence of new arboviruses persist.

Vectores de la leishmaniasis tegumentaria y la enfermedad de carrión en el Perú: una actualización / Update on tegumentary leishmaniasis and carrion's disease vectors in Peru

RESUMEN De las aproximadamente 190 especies de Lutzomyia en el Perú, solo un reducido número han sido incriminadas como vectores de leishmaniasis tegumentaria en valles occidentales e interandinos: Lutzomyia (Lu.) peruensis, Lu. verrucarum, Lu. tejadai, Lu. ayacuchensis, Lu. pescei; mientras que en la región amazónica Lu. yuilli yuilli, Lu. chagasi, Lu. davisi y Lu. auraensis han sido encontradas infectadas naturalmente con Leishmania del subgénero Viannia. Lutzomyia auraensis constituye un nuevo reporte como vector potencial de leishmaniasis en regiones neotropicales. En relación a los vectores de la bartonellosis humana o enfermedad de Carrión, Lu. verrucarum y Lu. peruensis son los vectores principales y de más amplia distribución en regiones andinas del norte, centro y sur del Perú. Otros potenciales vectores de la enfermedad de Carrión son Lu. serrana en el valle del Monzón, Huamalíes, Huánuco, Lu. pescei en Apurímac y Cusco; Lu. robusta y Lu. maranonensis en las provincias de Jaén, San Ignacio y Utcubamba, selva alta del Perú. Debido a la alta prevalencia de la leishmaniasis y bartonellosis en el Perú y a su dispersión que sobrepasa los límites de las áreas endémicas conocidas, es necesario actualizar tanto la información como los mapas de distribución de los vectores de estas enfermedades, para contribuir con el mejoramiento de las medidas de prevención y control. La información existente sobre flebotomíneos vectores en el Perú ha sido reunida en este artículo.

ABSTRACT Among approximately 190 species of Lutzomyia in Peru, only a small number have been identified as vectors of tegumentary leishmaniasis in Western and inter-Andean valleys. These include L. peruensis, L. verrucarum, L. tejadai, L. ayacuchensis, and L. pescei. In the Amazon region, L. yuilli yuilli, L. chagasi, L. davisi, and L. auraensis are naturally infected, among the subgenera Leishmania and Viannia. L. auraensis is newly reported as a potential vector of leishmaniasis in neotropical regions. Among the primary and most widely distributed vectors of human bartonellosis or Carrión's disease, L. verrucarum and L. peruensis are predominant in the Andean regions of northern, central, and southern Peru. Other potential vectors of Carrion's disease are L. serrana in the Monzon Valley, Huamalies, and Huanuco; L. pescei in Apurímac and Cusco; and L. robusta and L. maranonensis in Jaén, San Ignacio, and Utcubamba provinces, and the high forests of Peru. Because of the high prevalence of leishmaniasis and bartonellosis outside of known endemic areas in Peru, it is necessary to update data and distribution maps of these disease vectors. This may improve both prevention and control measures. Existing information about sandfly vectors in Peru is also provided in this article.

Seasonality of sand flies (Diptera: Psychodidae) and Leishmania DNA detection in vector species in an area with endemic visceral leishmaniasis

BACKGROUND Leishmaniases are a serious health problem in southeast Brazil, including the city of Belo Horizonte (BH), Minas Gerais state (MG), where there are high rates of incidence and mortality due to visceral leishmaniases. BH is divided into nine sanitary districts (SD) of which one, the Venda Nova SD, was selected for this study because it has high rates of positivity for canine leishmaniasis and high incidence of human leishmaniasis. OBJECTIVES This study aimed to survey the sand fly fauna in Venda Nova SD from August 2011 to July 2013 and perform a descriptive analysis of the vector population. METHODS The sampling was carried out using automatic HP light traps at all covered areas of the Venda Nova SD, in a total of eighteen light traps. Sampled specimens were identified following Galati (2003), and females were submitted to molecular techniques for the detection and identification of Leishmania DNA. A simple environmental description was done for it area and Kernel estimation was used to infer vector density for each study site. FINDINGS A total of 2,427 sand fly specimens belonging to eight species and five genera were collected of which 95.3% were Lutzomyia longipalpis. The seasonal variation curve was delineated by this species. Lu. longipalpis was the most abundant at all collection points and in all months of the study, and exhibited a natural infection rate of 1.01% for Leishmania infantum and 1.77% for Leishmania braziliensis. MAIN CONCLUSIONS The results show the presence and adaptation of Lu. longipalpis to the anthropic environment of BH and reinforces its role as the main vector of L. infantum in the region.

A ação da microbiota nativa de Lutzomyia longipalpis no desenvolvimento de Leishmania spp

As leishmanioses são doenças causadas por protozoários do gênero Leishmania e transmitidas pela picada dos flebotomíneos. O estudo da microbiota intestinal de Lutzomyia longipalpis é importante para determinar uma possível influência na competência vetorial desse inseto. In vitro, a ação da microbiota sobre o parasito foi avaliada demonstrando a lise na parede celular de L. infantum chagasi e L. braziliensis, causada por Serratia marcescens. Em estudos realizados in vivo, autores observaram uma redução no número de flebotomíneos infectados com Leishmania mexicana pré-alimentados com Pseudozyma sp., Asaia sp. e Ochrobactrum intermedium. Estes estudos sugerem que a microbiota do vetor pode modular a sua infecção por Leishmania, porém o seu papel ainda não esta claro. O trabalho aqui apresentado teve como objetivo caracterizar e avaliar o papel da comunidade bacteriana intestinal do Lu. longipalpis no desenvolvimento e diferentes espécies de Leishmania spp. Métodos morfológicos e moleculares foram utilizados para identificar e mapear a microbiota intestinal. O DNA das bactérias isoladas foram extraídos, a região 16S amplificada, utilizando-se um iniciador específico para esta região do DNA bacteriano. Em seguida, foram purificados, sequenciados e analisados em bancos de dados. Foram obtidas 60 UFCs (Unidades Formadoras de Colônias) e classificadas taxonomicamente em 10 gêneros bacterianos

A atividade lítica ou efeito in vitro dessas bactérias nativas isoladas de Lu. longipalpis (Gruta da Lapinha) foi analisada por co-cultura utilizando promastigotas de Leishmania (L.) infantum chagasi,Leishmania (L.) amazonensis, Leishmania (V.) braziliensis e Leishmania (L.) major na concentração de 4 x 106 parasitas / mL e incubadas com diferentes gêneros de bactérias na concentração de 1 x 108 UFC / mL. Quando os parasitas foram co-cultivados com o gênero bacteriano Lysinibacillus todos os parasitas de L. infantum chagasi e L. amazonensis morreram em até 24h. L. braziliensis e L. major em até 48h de co-cultivo. Entre 96 a 144 horas, não observou-se a lise de todos os parasitas de L. infantum chagasi e L. amazonensis co-cultivados com Pseudomonas e Enterobacter. As bactérias Pseudomonas, Enterobacter e Erwinia quando co-cultivadas com L. braziliensis e de L. major co-cultivados com Pseudomonas, Enterobacter e Enterococcus. Os gêneros Lysinibacillus e Serratia apresentaram efeitos lítico sobre todas as quatros espécies de Leishmania testadas, abrindo a perspectiva de serem utilizadas em experimentos in vivo

Estudo eco-epidemiológico dos hospedeiros e reservatórios de Leishmania na Reserva Particular do Patrimônio Natural Santuário do Caraça, Minas Gerais

As leishmanioses são doenças parasitárias de origem zoonótica, sendo transmitidas por flebotomíneos vetores em ambiente silvestres, rurais e urbano. Sua distribuição está condicionada não somente ao vetor, mas também aos mamíferos reservatórios. O presente trabalho teve como objetivo realizar estudos eco-epidemiológicos em relação aos hospedeiros vertebrados e invertebrados de Leishmania spp. no Santuário do Caraça. Do período de Junho de 2013 a Junho de 2014 foram realizadas coletas bimestrais intercaladas de flebotomíneos e de pequenos mamíferos em pontos selecionados ao acaso em locais de atração turística na RPPN Santuário do Caraça. Foram utilizadas 25 armadilhas luminosas do tipo CDC para coletas de flebotomíneos distribuídas em sete trilhas pelo parque. Para coleta dos pequenos mamíferos foram utilizadas 60 armadilhas do tipo Tomahalk distribuídas em seis trilhas (dez armadilhas por trilha). Um total de 376 flebotomíneos foi coletado (300 fêmeas e 76 machos) representando 18 espécies.

As espécies mais abundantes foram Psychodopygus lloydi(72,79%), Brumptomyia troglodytes (5,25%), Nyssomyia whitmani (4,01%) e Pintomyia monticola (4,30%). Duas amostras de Ps. lloydi foram detectadas com DNA de Leishmania (Viannia) braziliensis, utilizando a técnica ITS1 PCR-RFLP, e sete espécimes desta espécie foram identificados com sangue de porco doméstico (Sus scrofa) através de sequenciamento do gene ctyb. Um total de 55 pequenos mamíferos foi coletado tendo como espécies mais abundantes Akodon cursor (56,4%), Cerradomys subflavus (10,9%) e Oligoryzomys nigripes(10,9%). Foram obtidos seis isolados de Le. (V.) braziliensis de fígado e pele de cauda dos mamíferos das espécies A. cursor (3), C. subflavus (1) e Oxymicterus dasytrichus (1). Estes mesmos espécimes foram detectados positivos na técnica de kDNA PCR. Os resultados encontrados inferem que há circulação de Le. (V.) braziliensis neste ambiente silvestre e que Ps. lloydi possa desempenhar papel importante na manutenção do ciclo neste local e que, ainda, A. cursor, C. subflavus e O. dasytrichus atuam como hospedeiros de leishmaniose tegumentar na área de estudo

Estudo dos flebotomíneos (Diptera: Psychodidae) na localidade de Casa Branca, município de Brumadinho, área de transmissão para leishmanioses no Estado de Minas Gerais

As leishmanioses são doenças endêmicas em vários países do mundo, incluindo o Brasil e são causadas por parasitas do gênero Leishmania. O conhecimento sobre os vetores dessas doenças, os flebotomíneos, pode auxiliar no delineamento das medidas de controle da doença em determinados locais. O objetivo deste trabalho foi estudar a fauna de flebotomíneos, verificar a presença de DNA de Leishmanianas fêmeas capturadas e verificar a alimentação sanguínea nas fêmeas ingurgitadas coletadas na localidade de Casa Branca, pertencente ao município de Brumadinho, Minas Gerais. Durante o período de maio de 2013 a julho de 2014 foram realizadas coletas bimensais totalizando oito coletas sistematizadas de flebotomíneos utilizando 18 armadilhas luminosas expostas no peridomicílio de nove casas, selecionadas por apresentarem casos de leishmanioses humana ou canina. A fauna de flebotomíneos foi composta por 23 espécies, com um total de 16.771 flebotomíneos capturados, sendo a espécie Nyssomyia whitmani a mais abundante na área de estudo, seguida por Lutzomyialongipalpis e Migonemyiamigonei. As fêmeas não alimentadas pertencentes às coletas dos meses de maio/2013, setembro/2013, janeiro/2014 e maio/2014 foram dissecadas e colocadas em pools de no máximo 20 indivíduos onde foi feita a extração de DNA e posterior pesquisa de DNA de Leishmania por meio da técnica de PCR dirigida ao alvo ITS1.

As espécies de Leishmania e outros tripanossomatídeos detectados nos pools das fêmeas de flebotomíneos neste estudo foram identificados através da técnica de sequenciamento genético do produto amplificado. Foi possível detectar DNA de Leishmania em nove pools: Lu. longipalpis (1), Ny. whitmani (6) e Psychodopygus lloydi (2).Outros tripanossomatídeos foram detectados em 10 pools: Crithidia sp.em 1 pool de Ps. lloydi, Endotrypanum sp. em 6 pools de Ny. whitmani e Herpetomonas sp. nas espécies Ny. whitmani (3 pools) e no complexo cortelezzii (1 pool). As fêmeas alimentadas foram dissecadas e o DNA foi extraído para posterior identificação de fontes alimentares através da PCR dirigida ao gene do citocromo b com a confirmação pelo sequenciamento genético. Foram detectadas as fontes alimentares Canis familiaris, Gallus gallus, Homo sapiens e Rattus rattus, e a espécie Ny. whitmani foi a mais abundante capturada alimentada no peridomicílio. Os resultados da pesquisa de DNA de Leishmania chamam atenção para a presença das espécies de importância médica como Lu. longipalpis e Ny. whitmani presentes na área de estudo detectadas com Leishmania, reforçando seus papéis na epidemiologia das leishmanioses. Os outros tripanossomatídeos detectados nesse estudo mostram que pela PCR-ITS1 foi possível detectar outras espécies da família Trypanosomatidae além de Leishmania, evidenciando que essas espécies estão presentes na área de estudo. Os resultados do estudo das fontes alimentares mostraram que os flebotomíneos estão adaptados ao peridomicílio se alimentando em animais comuns a este ambiente

Leishmania amazonensis DNA in wild females ofLutzomyia cruzi (Diptera: Psychodidae) in the state of Mato Grosso do Sul, Brazil

Studies on natural infection by Leishmania spp of sandflies collected in endemic and nonendemic areas can provide important information on the distribution and intensity of the transmission of these parasites. This study sought to investigate the natural infection by Leishmaniain wild female sandflies. The specimens were caught in the city of Corumbá, state of Mato Grosso do Sul (Brazil) between October 2012-March 2014, and dissected to investigate flagellates and/or submitted to molecular analysis to detect Leishmania DNA. A total of 1,164 females (77.56% of which were Lutzomyia cruzi) representing 11 species were investigated using molecular analysis; 126 specimens of Lu. cruziwere dissected and also submitted to molecular analysis. The infection rate based on the presence of Leishmania DNA considering all the sandfly species analysed was 0.69%; only Leishmania (Leishmania) amazonensis was identified in Lu. cruzi by the molecular analysis. The dissections were negative for flagellates. This is the first record of the presence of L. (L.) amazonensis DNA in Lu. cruzi, and the first record of this parasite in this area. These findings point to the need for further investigation into the possible role of this sandfly as vector of this parasite.

Geographic distribution of phlebotomine sandfly species (Diptera: Psychodidae) in Central-West Brazil

This study updates the geographic distributions of phlebotomine species in Central-West Brazil and analyses the climatic factors associated with their occurrence. The data were obtained from the entomology services of the state departments of health in Central-West Brazil, scientific collections and a literature review of articles from 1962-2014. Ecological niche models were produced for sandfly species with more than 20 occurrences using the Maxent algorithm and eight climate variables. In all, 2,803 phlebotomine records for 127 species were analysed. Nyssomyia whitmani, Evandromyia lenti and Lutzomyia longipalpis were the species with the greatest number of records and were present in all the biomes in Central-West Brazil. The models, which were produced for 34 species, indicated that the Cerrado areas in the central and western regions of Central-West Brazil were climatically more suitable to sandflies. The variables with the greatest influence on the models were the temperature in the coldest months and the temperature seasonality. The results show that phlebotomine species in Central-West Brazil have different geographical distribution patterns and that climate conditions in essentially the entire region favour the occurrence of at least one Leishmania vector species, highlighting the need to maintain or intensify vector control and surveillance strategies.

Avaliação da infecção por Leishmania spp. em pequenos mamíferos de áreas endêmicas de Minas Gerais, Brasil

O conhecimento dos reservatórios de Leishmania spp. é crucial para o estabelecimento de medidas eficientes de controle das leishmanioses. A detecção,identificação da espécie de Leishmania bem como a quantificação da carga parasitária em diferentes amostras de animais podem ser ferramentas úteis na indicação da participação de um determinado hospedeiro como fonte de infecção para os vetores. Neste trabalho foi realizado um estudo sobre a infecção por Leishmania spp. em roedores e marsupiais em áreas endêmicas para as leishmanioses de Minas Gerais. As amostras utilizadas foram provenientes de pequenos mamíferos capturados em cinco localidades: Regional Nordeste de Belo Horizonte, Município de Divinópolis, Terra Indígena Xakriabá no Município de São João das Missões, Barra do Guaicuí em Várzea da Palma e Casa Branca, localidade pertencente ao Município de Brumadinho. A detecção e quantificação do DNA de Leishmania foram realizadas através da Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) e PCR em tempo real (qPCR) direcionadas ao alvo kDNA e a identificação da espécie através da PCR-RFLP direcionada ao hsp70. Foram capturados animais pertencentes a 14 diferentes espécies, das ordens Rodentia e Didelphimorfia. Os resultados mostraram que, em geral, a maioria dos animais foi capturada em áreas não urbanizadas e a maioria dos espécimes pertencem a ordem Rodentia. Dos 346 animais examinados, 78 (22%) foram positivos em pelo menos um tecido.

A maior positividade foi observada na Terra Indígena Xakriabá (35%), seguido pela Regional Nordeste de Belo Horizonte (27%), Casa Branca (24%), Divinópolis (9%) e Barra do Guaicuí (8%). Quanto às espécies de animais, Thrichomys apereoides e Didelphis albiventris tiveram um número expressivo de exemplares capturados (76 e 113 respectivamente) e uma positividade considerada alta (28% e 19%). Com relação aos tecidos, o fígado apresentou maior positividade (14%), seguido por medula(9%), baço (6%), pele de orelha (5%) e pele de cauda (4%). Nas amostras dos animais foram identificadas as espécies L. (V.) braziliensis, L. (L). infantum e L. (V.)guyanensis, sendo que a primeira foi encontrada infectando um maior número e uma maior diversidade de espécies de animais. Os animais capturados na Terra Indígena Xakriabá apresentaram a carga parasitária mais elevada, e, com relação às espécies dos hospedeiros, T. apereoides foi o que apresentou a maior carga parasitária. Quanto aos tecidos, houve uma alta positividade em amostras de fígado enquanto as amostras de baço apresentaram uma alta carga parasitária, o que aponta para a importância desses órgãos na infecção dos pequenos mamíferos por Leishmania spp.. A pele de orelha se mostrou eficiente na detecção das três espécies de Leishmania encontradas. Os resultados obtidos, aliados ao conhecimento epidemiológico da área, mostraram a importância da participação deste animais no ciclo de transmissão de Leishmania nas áreas endêmicas estudadas. Esses dados ressaltam a necessidade de mais estudos a respeito destas diferentes espécies de mamíferos, possíveis reservatórios de Leishmania spp.,visando a implementação de novas estratégias de vigilância epidemiológica e aplicação de medidas de controle específicas, tanto para leishmaniose tegumentar como para leishmaniose visceral.

Perfil da resposta imune celular em pacientes infectados pelo HIV com leishmaniose ou tuberculose / profile of the cellular immune response in HIV-infected patients with tuberculosis or leishmaniasis

A infecção pelo HIV promove a redução do número de linfócitos T CD4+ e, consequentemente, o surgimento de doenças oportunistas. A leishmaniose visceral e a tuberculose são comumente reconhecidas como doenças oportunistas importantes e associadas ao óbito de indivíduos infectados por HIV. Ambos os patógenos, Leishmania e Mycobacterium tuberculosis (Mtb) infectam cronicamente macrófagos. A imunidade protetora associada a estas infecções envolve linfócitos Th1 produtores de IFN-g. O prejuízo na resposta imune celular causado pelo HIV perturba a resposta imune contra estes patógenos. Não são bem determinadas quais alterações imunológicas causadas pelo HIV promovem o prejuízo na resposta imune específica contra a Leishmania spp. e Mtb, induzindo o desenvolvimento de formas atípicas e graves destas infecções. Deste modo, esta tese teve como objetivo descrever o perfil da resposta imune celular aos antígenos de Leishmania spp. ou Mtb em pacientes infectados com HIV. Para tal., foram recrutados pacientes infectados por HIV e com diagnóstico de leishmaniose (HIV/LV) e tuberculose (HIV/TB). Indivíduos não infectados por HIV e diagnóstico de leishmaniose (LV) ou tuberculose (TB) forma incluídos como controles. Foram avaliadas a linfoproliferação e a frequência das subpopulações de memória dos linfócitos T CD4+...

The HIV-infection promotes reduced number of CD4+ T-lymphocytes and manifestation of opportunistic diseases. Visceral leishmaniasis and tuberculosis are commonly known as main opportunistic infections and are associated with mortality in HIV-infected individuals. Both pathogens, Leishmania and Mycobacterium tuberculosis (Mtb), infect macrophages. The protect immune response involve T-lymphocytes help 1 (Th1) and producing of IFN-g. The impairment of cellular immune response caused by HIV disrupts the immune response against these pathogens. It is unclear which immunological alterations caused by HIV infection promote the damage in specific cellular immune response against Leishmania and Mtb and induces the development of atypical and severe forms. Thus, this thesis aimed to describe the profile of the cellular immune response to Leishmania antigens or Mtb in HIV infected patients. To this end, were recruited HIV infected patients with visceral leishmaniasis (HIV/VL) and HIV infected patients with active tuberculosis (HIV/TB). Moreover, HIV uninfected individuals with VL or TB were also included as controls. Lymphoproliferation and frequency of memory CD4+...

Perfil de transcrição gênica de células humanas estimuladas com a saliva de Lu. intermedia ou de Lu / Gene transcription profile of human cells stimulated with Lu saliva. Intermedia or Lu

A saliva dos flebotomíneos transmissores do parasita Leishmania possui uma variedade de agentes farmacológicos, como anticoagulantes, vasodilatadores além de moléculas imunomoduladoras e anti-inflamatórias. A saliva de Lu. intermedia e de Lu. longipalpis provocam o aumentam da infecção por diferentes espécies de Leishmania, em modelos experimentais.Entretanto a pré-exposição à saliva de Lu. longipalpis confere proteção a infecção, enquanto a pré-exposição à saliva de Lu. intermedia causa exacerbação da doença. Neste trabalho estimulamos as células do sangue de voluntários sadios com a saliva de Lu. intermedia ou de Lu. longipalpis e, posteriormente, o RNA foi extraído e utilizado no sequenciamento em larga escala (RNAseq). O estudo demonstrou que a saliva de Lu. intermedia e de Lu.longipalpismodula a expressão de uma série de genes e os processos biológicos mais requentes são semelhantes após a estimulação com as duas diferentes salivas. Identificamos seis processos biológicos comuns às salivas dos dois lebotomineos:Taxis,Chemotaxis,Locomotory behavior, Positive regulation of immune system process, Regulation of cytokine production e Regulation of cell activation. Dentre os genes que caracterizam esses seis processos,detectamosgenes que codificam quimiocinas, citocinas além de moléculas de superfície tais como CCL19, CCL2, CCL3, CCL4, CD80, CD83, IL10, IL1B, IL4, IL6.Definimos um conjunto de genes encontrados exclusivamente na amostra estimulada com a saliva de Lu. intermedia (ADA, CCL23, CCL3, CCL3L1, CXCL11, PDGFB, PDPN, PLAU e TNFSF15). Da mesma forma, encontramos um outro conjunto de genes expresso exclusivamenteem células estimuladas com a saliva de Lu. longipalpis(ENPP2, EREG, IDO1,IL1A e VEGFA). Essas diferenças podem fornecer pistas para o desenvolvimento da leishmaniose em indivíduos continuamente expostos à saliva de Lu. intermedia.

The saliva of sand flies, vectors of leishmania parasite, has a variety of pharmacological agents, such as anticoagulants, vasodilators as well as immunomodulatory and antiinflammatory molecules. Lu. intermedia and Lu. longipalpis increase the infection by different species of leishmania in experimental models. However, the pre-exposure to Lu. longipalpis saliva provides protection to infection, while the pre-exposure Lu. intermedia saliva causes exacerbation of the disease. In this work, we stimulated peripheral blood cells from healthy volunteers with salivary glands from Lu. intermedia or Lu. longipalpis and later RNA was extracted and used in large-scale sequencing (RNAseq). This study demonstrated that Lu. intermedia and Lu. longipalpis saliva modulate the expression of a number of genes and the most frequent biological processes are similar in cells stimulated with both saliva. We identified six biological processes commonly upregulated following stimulation with saliva of the two sand flies: taxis, chemotaxis, locomotory behavior, positive regulation of immune system process, regulation of cytokine production and regulation of cell activation. Among the genes that characterize these six biological processes, we detected genes encoding chemokines, cytokines plus surface molecules such as:CCL19, CCL2, CCL3, CCL4, CD80, CD83, IL10, IL1B, IL4 and IL6. We found a set of genes upregulated exclusively in cells stimulated with Lu. intermedia saliva (ADA, CCL23, CCL3, CCL3L1, CXCL11, PDGFB, PDPN, PLAU and TNFSF15). Similarly, another set of genes was expressed only in cells stimulated Lu. longipalpis saliva (ENPP2, EREG, IDO1,IL1A and VEGFA). These differences may provide clues for the development of leishmaniasis in individuals continuously exposed to Lu. intermedia saliva.

Avaliação da infecção por Leishmania spp. em pequenos mamíferos de áreas endêmicas de Minas Gerais, Brasil / Infection assessment by Leishmania spp. in small mammals endemic areas of Mines Minas, Brazil

O conhecimento dos reservatórios de Leishmania spp. é crucial para o estabelecimento de medidas eficientes de controle das leishmanioses. A detecção,identificação da espécie de Leishmania bem como a quantificação da carga parasitária em diferentes amostras de animais podem ser ferramentas úteis na indicação da participação de um determinado hospedeiro como fonte de infecção para os vetores. Neste trabalho foi realizado um estudo sobre a infecção por Leishmania spp. em roedores e marsupiais em áreas endêmicas para as leishmanioses de Minas Gerais. As amostras utilizadas foram provenientes de pequenos mamíferos capturados em cinco localidades: Regional Nordeste de Belo Horizonte, Município de Divinópolis, Terra Indígena Xakriabá no Município de São João das Missões, Barra do Guaicuí em Várzea da Palma e Casa Branca, localidade pertencente ao Município de Brumadinho. A detecção e quantificação do DNA de Leishmania foram realizadas através da Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) e PCR em tempo real (qPCR) direcionadas ao alvo kDNA e a identificação da espécie através da PCR-RFLP direcionada ao hsp70. Foram capturados animais pertencentes a 14 diferentes espécies, das ordens Rodentia e Didelphimorfia. Os resultados mostraram que, em geral, a maioria dos animais foi capturada em áreas não urbanizadas e a maioria dos espécimes pertencem a ordem Rodentia. Dos 346 animais examinados, 78 (22%) foram positivos em pelo menos um tecido...

A maior positividade foi observada na Terra Indígena Xakriabá (35%), seguido pela Regional Nordeste de Belo Horizonte (27%), Casa Branca (24%), Divinópolis (9%) e Barra do Guaicuí (8%). Quanto às espécies de animais, Thrichomys apereoides e Didelphis albiventris tiveram um número expressivo de exemplares capturados (76 e 113 respectivamente) e uma positividade considerada alta (28% e 19%). Com relação aos tecidos, o fígado apresentou maior positividade (14%), seguido por medula(9%), baço (6%), pele de orelha (5%) e pele de cauda (4%). Nas amostras dos animais foram identificadas as espécies L. (V.) braziliensis, L. (L). infantum e L. (V.)guyanensis, sendo que a primeira foi encontrada infectando um maior número e uma maior diversidade de espécies de animais. Os animais capturados na Terra Indígena Xakriabá apresentaram a carga parasitária mais elevada, e, com relação às espécies dos hospedeiros, T. apereoides foi o que apresentou a maior carga parasitária. Quanto aos tecidos, houve uma alta positividade em amostras de fígado enquanto as amostras de baço apresentaram uma alta carga parasitária, o que aponta para a importância desses órgãos na infecção dos pequenos mamíferos por Leishmania spp.. A pele de orelha se mostrou eficiente na detecção das três espécies de Leishmania encontradas. Os resultados obtidos, aliados ao conhecimento epidemiológico da área, mostraram a importância da participação deste animais no ciclo de transmissão de Leishmania nas áreas endêmicas estudadas. Esses dados ressaltam a necessidade de mais estudos a respeito destas diferentes espécies de mamíferos, possíveis reservatórios de Leishmania spp.,visando a implementação de novas estratégias de vigilância epidemiológica e aplicação de medidas de controle específicas, tanto para leishmaniose tegumentar como para leishmaniose visceral...

PCR em tempo real para caracterização de fontes alimentares de flebotomíneos (Diptera: Psychodidae) / Real-time PCR for the characterization of feeding sources of sand flies (Diptera: Psychodidae)

Os flebotomíneos são insetos hematófagos de grande importância médica e veterinária atuando como vetores de parasitas como Leishmania. O estudo do padrão alimentar desses vetores pode ajudar a compreender a sua interação com potenciais reservatórios de Leishmania. Neste estudo, desenvolvemos ensaios de PCR em tempo real para identificação de sangue em flebotomíneos. Seis pares de primers foram desenhados com base no gene citocromo b de sequencias disponíveis no GenBank dos seguintes hospedeiros potenciais: cão, gato, cavalo, galinha, rato e humano. Primeiramente, os ensaios de PCR em tempo real utilizando SYBR Green foram conduzidos usando uma curva padrão com oito concentrações diferentes (i.e., 10 ng, 1 ng, 100 pg, 10 pg, 1 pg, 100 fg, 10 fg e 1 fg por 2 µl) de amostras do DNA extraído do sangue com EDTA a partir de cada espécie de animal. Em seguida, o DNA foi extraído de 100 fêmeas de flebotomíneos ingurgitadas de campo pertencentes a três espécies (i.e., Lutzomyia longipalpis, L. migonei e L. lenti) foram testadas pelos protocolos aqui padronizados. Fêmeas de flebotomíneos foram experimentalmente alimentadas em um rato (Rattus rattus) e utilizadas para avaliar a detecção do ensaio. Os protocolos funcionaram de forma eficiente com limites de detecção de 10 pg a 100 fg. Fêmeas de flebotomíneos ingurgitadas coletadas no campo estavam alimentadas de humanos...

Lista actualizada de flebotomíneos (Diptera: Psychodidae: Phlebotominae) de la región cafetera colombiana / An updated checklist of Phlebotomine sand flies (Diptera: Psychodidae: Phlebotominae) from the Colombian Andean coffee-growing region

Se presenta una lista actualizada de especies de flebotomíneos en zonas cafeteras de la región andina colombiana. Con base en la revisión y verificación taxonómica, se registraron 53 especies presentes en 12 departamentos. Además de los registros obtenidos con base en un muestreo intensivo en cinco departamentos, se recopilaron los datos existentes en trabajos publicados y en la revision taxonómica de los especímenes de la zona pertenecientes a la colección entomológica del Programa de Estudio y Control de Enfermedades Tropicales (PECET). El listado comprende los géneros Brumptomyia (2 especies), Lutzomyia (50 especies) y Warileya (1 especie). Con base en este trabajo se confirmaron 11 nuevos registros de especies en la región cafetera colombiana, entre los cuales es relevante Lutzomyia panamensis , especie de importancia médica no registrada previamente en esta zona. En total, 18 especies de las registradas poseen hábitos antropofílicos o están relacionadas con la transmisión de Leishmania spp.

An updated list of phlebotomine sand flies species in coffee growing areas in the Colombian Andean region is presented. Fifty three species were reported from 12 departments. In addition, species distribution in the region was derived from specimens obtained during intensive field work in five departments, from previously published studies and from the taxonomic revision of specimens in the entomological collection of the Programa de Estudio y Control de Enfermedades Tropicales (PECET). The list includes the genera Brumptomyia (2 species), Lutzomyia (50 species) and Warileya (1 species). The updated list contains eleven new records in the region under study, including Lutzomyia panamensis , a species of medical importance not recorded previously in this zone. Eighteen of the species are considered to be anthropophilic, and many of them have been implicated in the transmission of leishmaniasis.

Leishmaniasis transmission: distribution and coarse-resolution ecology of two vectors and two parasites in Egypt

Introduction: In past decades, leishmaniasis burden has been low across Egypt; however, changing environment and land use has placed several parts of the country at risk. As a consequence, leishmaniasis has become a particularly difficult health problem, both for local inhabitants and for multinational military personnel. Methods: To evaluate coarse-resolution aspects of the ecology of leishmaniasis transmission, collection records for sandflies and Leishmania species were obtained from diverse sources. To characterize environmental variation across the country, we used multitemporal Land Surface Temperature (LST) and Normalized Difference Vegetation Index (NDVI) data from the Moderate Resolution Imaging Spectroradiometer (MODIS) for 2005-2011. Ecological niche models were generated using MaxEnt, and results were analyzed using background similarity tests to assess whether associations among vectors and parasites (i.e., niche similarity) can be detected across broad geographic regions. Results: We found niche similarity only between one vector species and its corresponding parasite species (i.e., Phlebotomus papatasi with Leishmania major), suggesting that geographic ranges of zoonotic cutaneous leishmaniasis and its potential vector may overlap, but under distinct environmental associations. Other associations (e.g., P. sergenti with L. major) were not supported. Mapping suitable areas for each species suggested that northeastern Egypt is particularly at risk because both parasites have potential to circulate. Conclusions: Ecological niche modeling approaches can be used as a first-pass assessment of vector-parasite interactions, offering useful insights into constraints on the geography of transmission patterns of leishmaniasis. .